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單域抗體金斯瑞生物告知您ELISA試劑盒實驗的加樣原理ELISA是免疫學(xué)中常用檢測辦法,在ELISA試驗進程中加樣也是極為重要的步驟之一。今日,金斯瑞生物將為廣大科研朋友解說ELISA試劑盒試驗加樣的原理,以供咱們參閱: 正確的加樣辦法應(yīng)為45度,吸頭貼著孔壁參加,應(yīng)留意視點太小,會使液體殘留在孔壁上,導(dǎo)致加樣不精確;吸頭應(yīng)當(dāng)貼著管壁和液面的交界處! 要留意防止呈現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有相似過氧化物的活性,因此,在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很容易在溫育進程中吸附于固相,然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。 血清標(biāo)本如是以無菌操作別離,則可以在2——8 ℃下保存一周,如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長時間保存,應(yīng)在-70 ℃以下。樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染,一則細菌的成長,其所排泄的一些酶可能會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化效果;二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作標(biāo)記的測定辦法發(fā)生非特異性干擾。 標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細菌污染所形成的的混濁或絮狀物時,應(yīng)離心沉積后取上清檢測。冰凍保存的血清標(biāo)本須留意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)生損壞效果,然后引起假陰性成果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留意,不要進行劇烈振動,重復(fù)倒置混勻即可。 |